Evoluo de nerekta ELISA-metodo por detekto de porka akuta diareo-sindromo koronavirus-IgG-antikorpo bazita sur rekombina pikproteino

Porka Akuta Diareo-Sindromo Coronavirus (SADS-CoV) estas lastatempe malkovrita porka entera patogena koronavirus, kiu povas kaŭzi akvan diareon en novnaskitaj porketoj kaj kaŭzi gravajn ekonomiajn perdojn al la porka industrio.Nuntempe, ne ekzistas taŭga serologia metodo por taksi la efikecon de SADS-CoV-infekto kaj vakcino, do urĝas uzi efikan enzim-ligitan imunosorban analizon (ELISA) por kompensi ĉi tiun mankon.Ĉi tie, rekombina plasmido esprimanta SADS-CoV-pikilo (S) proteinon kunfandita kun homa IgG Fc-domajno estis konstruita por produkti rekombinan baculoviruson kaj esprimita en HEK 293F-ĉeloj.La S-Fc-proteino estas purigita kun proteina G-rezino kaj retenas la reagemon kun kontraŭ-homaj Fc kaj kontraŭ-SADS-CoV antikorpoj.Tiam S-Fc-proteino estis uzita por evoluigi nerektan ELISA (S-iELISA) kaj optimumigi la reagkondiĉojn de S-iELISA.Kiel rezulto, analizante la OD450nm-valoron de 40 SADS-CoV-negativaj serumoj konfirmitaj per imunofluoreskeca analizo (IFA) kaj okcidenta blotting, la detranĉa valoro estis determinita esti 0.3711.La koeficiento de variado (CV) de la 6 SADS-CoV pozitivaj serumoj ene kaj inter kuroj de S-iELISA estis ĉiuj malpli ol 10%.La krucreaktivectesto montris ke S-iELISA havas neniun krucreaktivecon kun aliaj porkaj virusserumoj.Krome, surbaze de la detekto de 111 klinikaj serumaj specimenoj, la totala koincido indico de IFA kaj S-iELISA estis 97.3%.La provo de neŭtraliga viruso kun 7 malsamaj valoroj de OD450nm de serumo montris, ke la valoro de OD450nm detektita de S-iELISA estis pozitive korelaciita kun la provo de neŭtraliga viruso.Fine, S-iELISA estis farita sur 300 porkaj farm-serumaj specimenoj.Komercaj ilaroj de aliaj porkaj enterovirusoj montris ke la IgG-pozitivaj indicoj de SADS-CoV, TGEV, PDCoV kaj PEDV estis 81.7%, 54%, kaj 65.3%, respektive., 6%, respektive.La rezultoj montras, ke la S-iELISA estas specifa, sentema kaj reproduktebla, kaj povas esti uzata por detekti SADS-CoV-infekton en la porka industrio.Ĉi tiu artikolo estas protektita per kopirajto.ĉiuj rajtoj rezervitaj.


Afiŝtempo: Jun-22-2021